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- 2021-04-25 发布
限时规范训练(七)
1．关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )
A．用于培养的细胞大都取自胚胎、幼龄动物的器官或组织
B．将所取的组织需用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞
C．在培养瓶中要定期用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离，制成细
胞悬浮液
D．动物细胞培养只能传 50 代左右，所培养的细胞都会衰老死亡
答案 D
解析 动物细胞培养传至 10～50 代左右时，绝大部分细胞分裂停止，
进而出现衰老甚至死亡的现象，但少数细胞的遗传物质会发生改变，
获得不死性，就能在适宜培养条件下无限制地传代下去。
2．名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后，给皮肤烧
伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本，再让
其在特殊的膜片上增殖。5～7 天后，将膜片敷在患者的伤口上，膜
片会将细胞逐渐“释放”到伤口，并促进新生皮肤层生长，达到加速
伤口愈合的目的。下列有关叙述中，错误的是( )
A．“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程
B．人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降
C．种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人
D．膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口，加速患者自身皮肤愈合与
细胞膜上的糖蛋白有关
答案 B
解析 根据题意可知，“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程中
的动物细胞培养；人的皮肤烧伤后会因人体第一道防线的破坏而导致
免疫力下降；种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人，以避免发
生免疫排斥反应；细胞膜上的糖蛋白具有识别、免疫、保护等作用，
与细胞免疫排斥反应有关，因此膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口，
加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关。
3．下列关于哺乳动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的
是( )
A．体细胞核移植过程中通常用卵细胞作为受体细胞
B．目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体
C．利用动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜
D．用于核移植的供体细胞一般都选用传代 50 代以内的细胞
答案 C
解析 体细胞核移植过程中常用处于 MⅡ中期的卵母细胞作为受体
细胞；动物体细胞的全能性受到限制，不能经过培养获得完整的动物
个体；用于核移植的供体细胞一般是 10 代以内的细胞；克隆动物细
胞核内的遗传物质来自供体细胞，其性别与提供细胞核的动物一致，
因此可有选择地克隆某一性别的家畜。
4．下图是某克隆羊的培育过程模式图，则与获得该克隆羊接近的生
殖方式和其发育成熟时所分泌的主要性激素分别是( )
A．无性生殖、雄性激素 B．无性生殖、雌性激素
C．有性生殖、雄性激素 D．有性生殖、雌性激素
答案 A
解析 克隆羊的产生属于无性生殖；由于此过程是雄性羊供核，故得
到的克隆羊为雄性，所分泌的主要性激素是雄性激素。
5．在将动物组织块分散成单个细胞时，可以使用胰蛋白酶。由此判
断以下推测不合理的是( )
A．动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系
B．处理时一定要注意处理时间、加酶量
C．胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤
D．动物细胞培养液的 pH 应与胰蛋白酶作用的适宜 pH 基本一致
答案 C
解析 胰蛋白酶可使蛋白质分解，又可破坏动物细胞之间的联系，可
推测动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系；细胞膜中含有蛋白质成
分，所以一定要注意处理的时间和酶的用量，以防止对动物细胞造成
损伤；酶促反应需要适宜的 pH，所以培养液的 pH 应与胰蛋白酶作
用的适宜 pH 基本一致。
6．实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是
( )
A．甲过程需要在无菌条件下进行
B．乙过程可用胰蛋白酶处理皮肤组织
C．丙过程是原代培养，会出现接触抑制现象
D．丁过程是传代培养，细胞不能保持二倍体核型
答案 D
解析 甲过程取小鼠的皮肤组织应在无菌条件下进行；乙过程可用胰
蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织，获得单细胞悬液；丙过程是原代
培养，原代培养会出现接触抑制现象；丁过程是传代培养，传代培养
细胞通常 10 代以内能保持二倍体核型，10 代以后核型可能发生变化。
7．从母羊甲的体细胞中取出细胞核，移植入母羊乙的去核卵母细胞
中，融合后的细胞经有丝分裂形成早期胚胎，再植入另一只母羊丙的
子宫内。下列有关说法正确的是( )
A．生出小羊的性状与甲羊完全相同
B．一般来说生出小羊的核基因型与甲羊完全相同
C．生出小羊的遗传物质由甲、乙两双亲共同决定，所以该过程为有
性生殖
D．生出小羊的性状由甲、乙、丙三个亲本的基因型与环境共同决定
答案 B
解析 小羊由重组细胞发育而来，重组细胞的细胞核来自甲羊，细胞
质来自乙羊；遗传物质 DNA 主要在细胞核内，少量存在于细胞质的
线粒体内，故小羊性状大部分与甲羊相同，少量与乙羊相同；此过程
为无性生殖。
8.如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据图回答：
(1) 容 器 A 中 放 置 的 是 动 物 器 官 或 组 织 ， 它 一 般 取 自
________________。
(2)容器 A 中的动物器官或组织首先要进行的处理是________，然后
用________酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是
______________________。
(3)培养先在 B 瓶中进行，瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无
机盐、维生素和________等，细胞增殖产生的新细胞会表现出
________生长现象。当细胞分裂生长相互接触时，就会停止分裂增殖，
这称为________现象。需用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，称为
________。
(4) 细 胞 在 C 瓶 培 养 ， 出 现 极 少 数 细 胞 无 限 繁 殖 ， 其 原 因 是
___________________________________________________________
_____________。
答案 (1)胚胎或幼龄动物
(2)剪碎 胰蛋白(或胶原蛋白) 使细胞与培养液充分接触
(3)动物血清 贴壁 接触抑制 传代培养
(4)细胞的遗传物质发生了改变，带有癌变特点
解析 (1)胚胎或幼龄动物的细胞具有旺盛的分裂能力，培养后可获
得较多细胞。(2)为了增加细胞与培养液的接触面积，应使细胞分散
开来，可先用物理方法剪碎，再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(3)
血浆中含有丰富的营养成分，为良好的天然营养物质；在培养过程中
细胞会出现接触抑制现象，需用胰蛋白酶处理，使之分散开，以便与
培养液充分接触；若再分瓶培养则为传代培养。(4)培养过程中细胞
的遗传物质可能发生变异而具有癌细胞的特点，即具有无限增殖能
力。
9．核苷酸合成有两个途径，物质 A 可以阻断其中的全合成途径(如下
图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单
克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入 H、A、T 三
种物质的“HAT 培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理
的叙述，正确的是( )
A．免疫的 B 细胞及其互相融合细胞因全合成途径被 A 阻断而在 HAT
培养基上不能增殖
B．骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在 HAT
培养基上不能增殖
C．杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径，所以能在 HAT 培养基
上大量增殖
D．HAT 培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生
高纯度的目标抗体
答案 B
解析 免疫的 B 细胞及其互相融合细胞均属于高度分化的细胞，不
能增殖，A 项错误；骨髓瘤细胞及其互相融合细胞缺乏转化酶，又因
HAT 培养基中的物质 A 阻断了全合成途径，所以在 HAT 培养基上
不能增殖，B 项正确；杂交瘤细胞因为可以进行补救合成途径，能够
在 HAT 培养基上大量增殖，C 项错误；HAT 培养基上筛选出的杂交
瘤细胞能大量增殖，也能产生专一的抗体，但不一定产生目标抗体，
D 项错误。
10．如图为小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)培养的过程图，下列叙述错误
的是( )
A．可用胶原蛋白酶分散组织块中的细胞
B．MEF 细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化
C．加入培养液中的 MEF 细胞最好是来自传代培养的细胞
D．细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象
答案 C
解析 将动物组织细胞分散成单个细胞，可以用胶原蛋白酶或胰蛋白
酶处理；由图可知，在胚胎干细胞培养液中加入 MEF 细胞，胚胎干
细胞不分化，但未加入 MEF 细胞的一组易分化，据此推知 MEF 细
胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化；加入培养液中的 MEF
细胞最好是来自原代培养的细胞；在动物细胞培养过程中可能出现细
胞贴壁和接触抑制的现象。
11．动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物
质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。不能从该
图获得的结论是( )
A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
B．有无血清对正常细胞培养的影响较大
C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
D．培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
答案 A
解析 分析图中曲线可知，对癌细胞来说，相同的培养时间内，培养
基中有无血清，其细胞数目相差不大，说明培养基中有无血清对癌细
胞的培养影响不大；对正常细胞来说，在相同的培养时间内，有血清
的培养基中培养的细胞数目远远多于没有血清的培养基中培养的细
胞数目，说明有无血清对正常细胞的培养影响较大；在相同条件和相
同的培养时间内，癌细胞和正常细胞的数目差距较大，正常细胞达到
一定的数目后不再增加，而癌细胞却能不断增加。
12．某研究小组为测定某药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动
物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法
不正确的是( )
A．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理
B．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的
抗生素
C．细胞培养应在含 CO2 的恒温培养箱中进行，其作用是维持培养液
的 pH
D．将数量相等的甲、乙细胞分别置于相同且适宜的条件下培养，一
段时间后，会观察到甲细胞的数量比乙细胞的多
答案 A
解析 动物细胞培养的适宜 pH 为 7.2～7.4，而在这样的环境中胃蛋
白酶会变性失活，因此在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，不可
用胃蛋白酶处理，而用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，A 项错误；向培
养液中加入适量的抗生素，可以防止细胞培养过程中细菌的污染，B
项正确；动物细胞培养所需气体主要是 O2(细胞代谢必需的)和
CO2(维持培养液的 pH)，C 项正确；肝肿瘤细胞代谢和繁殖速度较快，
故数量相等的甲、乙细胞分别置于相同且适宜的条件下培养，一段时
间后，会观察到甲细胞的数量比乙细胞的多，D 项正确。
13．下图是克隆羊的培育流程图，根据所学知识回答下列问题。
(1)培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养
到____________________。
(2)从供体羊中取上皮细胞，用________处理，然后进行分散培养。
培养过程一般在________中进行，整个过程必须保证细胞处于
________的环境中，所需营养物质要与体内基本相同。
(3)通过________法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞
核吸出外，往往还会将________一并吸出。
(4)去核的卵母细胞与供体细胞通过电激后融合，________进入受体
卵母细胞，构建成重组细胞，融合后的重组细胞，需要用物理或化学
的方法进行激活，使其完成______________过程。
答案 (1)减数第二次分裂中期
(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) CO2 培养箱 无菌、无毒
(3)显微操作 第一极体
(4)供体核 细胞分裂和发育
解析 (1)核移植时，卵母细胞需在体外培养到减数第二次分裂中期。
(2)动物细胞培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织使其分散
成单个细胞；动物细胞培养过程必须保证细胞处于无菌、无毒的环境
中，且一般在 CO2 培养箱中进行培养。(3)核移植过程中，通过显微
操作法吸出卵母细胞中的细胞核，由于减数第二次分裂中期卵母细胞
核的位置靠近第一极体，所以用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极
体。(4)去核的卵母细胞与供体细胞通过电激后融合，供体核进入受
体卵母细胞，构建成重组细胞，融合后的重组细胞，需要用物理或化
学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育过程。
14．某研究小组进行药物实验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对
体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤
细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及
其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量
________。
(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因
是______________________________________________________
___________________________________________________________
_____________。
(3) 在 两 种 细 胞 生 长 过 程 中 ， 当 乙 细 胞 铺 满 瓶 壁 时 ， 其 生 长
____________。药物实验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞
比乙细胞可以传代的次数更________。若用动物的肝脏组织块制备肝
细胞悬液，需用________处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的
________。
(5)已知癌细胞的 X 基因表达过量与肝肿瘤的发生密切相关。要实验
一种抗肿瘤药物 Y 对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为 A、B 两
组，A 组细胞培养液中加入________，B 组细胞培养液中加入无菌生
理盐水。经培养后，从 A、B 两组收集等量细胞，通过分别检测 X
基因在 A、B 两组细胞中的________或________合成水平的差异，确
定药物 Y 的药效。
答案 (1)多
(2)血清中含有适合动物细胞生长增殖的多种物质
(3)产生接触抑制 多 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)
(4)抗生素 (5)药物 Y mRNA 蛋白质
解析 (1)肿瘤细胞具有无限增殖能力，细胞周期短，相同培养时间
内，甲细胞的数量多于乙细胞。(2)动物血清中含有能促进细胞生长
和增殖的多种物质，是天然的培养基。(3)动物细胞培养时为了获得
细胞悬液，需用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理组织块，使组织块中的
细胞分散成单个细胞。(4)动物细胞培养时需要创造无菌的环境，因
此为了防止病菌污染，可在培养基中添加适量的抗生素。(5)设计对
照实验需要遵循单一变量原则，因此 A 组需要加入药物 Y，可通过
检测基因是否完成转录和翻译来确定 Y 的药效。
15．2017 年 11 月 27 日，世界上首例体细胞克隆猴“中中”诞生；
12 月 5 日，第二例克隆猴“华华”诞生。我国科学家攻克了与人类
相近的灵长类动物猕猴的体细胞克隆的难题。获得克隆猴的流程如图
所示，据图回答问题：
(1)“中中”和“华华”的性状与________(填“核供体”“卵母细胞
供体”或“代孕”)动物的性状基本无关。
(2)图示过程运用了____________(填“胚胎细胞核移植”或“体细胞
核移植”)技术，该技术难度________，原因是
___________________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
_____________________________________。
(3)欲获得单个雌猕猴体细胞，可用__________________酶处理动物
组织块。过程①表示去除卵母细胞的细胞核，该过程一般要将卵母细
胞培养至________________期再进行，目前常用的去核方法是
________________ 。 将 卵 母 细 胞 作 为 受 体 细 胞 的 原 因 是
___________________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
____________________________________________________(答出两
点即可)。
(4)与克隆羊多利培养成功一样，“中中”和“华华”克隆猕猴的成功
证明了____________________________________。
答案 (1)代孕
(2)体细胞核移植 更高 胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对
容易；动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难
(3)胰蛋白酶(或胶原蛋白) 减数第二次分裂中 显微操作去核法
①此类细胞体积大，易于操作；②可为重组细胞早期发育提供较充足
的营养；③卵母细胞的细胞质中存在激发动物体细胞的细胞核全能性
表达的物质
(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性
解析 (1)代孕动物只是为通过核移植技术得到的胚胎的发育提供营
养物质和发育场所，因此克隆猴的性状与代孕动物的性状基本无关。
(2)由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物
体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此哺乳动物体细胞核
移植的难度高于胚胎细胞核移植。(3)欲获得单个雌猕猴体细胞，可
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织块。过程①表示去除卵母细胞
的细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至减数第二次分裂中期再进
行，目前常用的去核方法是显微操作去核法。核移植时选择卵母细胞
作为受体细胞的原因有：①此类细胞体积大，易于操作；②可为重组
细胞早期发育提供较充足的营养；③卵母细胞的细胞质中存在激发动
物体细胞的细胞核全能性表达的物质。(4)克隆羊多利与克隆猴“中
中”“华华”的诞生证明了动物已分化体细胞的细胞核具有全能性。